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M199 培養基粉狀 M199 培養基

粉狀 M199 培養基

M199的全稱是Medium 199,即medium 199,由Morgan等人設計。 1950年。最初用於雞胚成纖維細胞的營養研究,後廣泛用於各種動物細胞的培養,包括一些非哺乳動物細胞。

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M199特別適用於非轉化細胞的培養,也常用於病毒學、疫苗生產以及大鼠胰腺上皮細胞和小鼠晶狀體組織原代外植體的體外培養。 與其他基礎培養基相比,M199含有獨特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黃嘌呤、胸腺嘧啶和其他維生素。 M199有兩種平衡鹽成分,Earle's鹽成分常用於CO2環境,Hank's鹽成分用於非CO2環境。199培養基不含蛋白質、脂質或生長因子。 培養基 199 使用碳酸氫鈉緩衝系統 (2.2 g/L),因此需要 5–10​​2% CO199 環境來維持生理 pH 值。 對於廣泛的細胞培養應用,我們提供含有各種成分的改良 M199 培養基,以及含有可定製成分的 MXNUMX 培養基。

粉狀 M199 培養基成分

P / N規範成份說明
HCY-BCMP12001A1L×10袋包括: 葡萄糖、厄爾鹽、酚紅 
不包含: HEPES,不含丙酮酸鈉,不含碳酸氫鈉
HCY-BCMP12001B10L×1瓶包括: 葡萄糖、厄爾鹽、酚紅 
不包含: HEPES,不含丙酮酸鈉,不含碳酸氫鈉
HCY-BCMP12002A1L×10袋包括: 葡萄糖、漢克鹽、酚紅 
不含: 丙酮酸鈉、碳酸氫鈉
HCY-BCMP12002B10L×1瓶包括: 葡萄糖、漢克鹽、酚紅 
不含: 丙酮酸鈉、碳酸氫鈉

此M199乾粉細胞培養基在配製時需補充碳酸氫鈉、調pH、過濾。 詳細製備方案如下:

  1. 將 950 mL 蒸餾水添加到盡可能接近最終體積的混合容器中。
  2. 將乾燥介質加入室溫(15°C 至 30°C)水中並輕輕攪拌。 不要加熱水。
  3. 沖洗包裝內部以去除任何殘留的粉末。
  4. 向培養基中加入 29.3 mL 的 75 g/L NaHCO3 溶液。
  5. 通過緩慢添加和攪拌 0.2 N NaOH 或 0.3 N HCl,將 pH 值調節至低於所需最終工作 pH 值 1 至 1 個單位。 過濾後 pH 值可能升高 0.1 至 0.3 個單位。 推薦的工作 pH 值為 7.1-7.4。
  6. 用蒸餾水調整最終體積。
  7. 使用正壓系統,立即通過 0.2 μm 過濾器的膜過濾功能將介質處理到無菌容器中。

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